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高效液相色谱-质谱联用定量检测人血清5个溶血磷脂酰胆碱的浓度
作者:张磊 武玉晶 范志娟 康华 王宇凡 刘树业 单忠强
关键词: 代谢组学; 液相色谱-质谱联用; 溶血磷脂酰胆碱(LPC); 内标法; 乙肝相关性肝细胞肝癌(HBV-HCC);
摘要:目的:利用代谢组学代谢靶标分析技术,建立一种定量检测人血清中溶血磷脂酰胆碱(LPC)类物质的方法。方法:以高效液相色谱与串联质谱联用(HPLC-MS/MS)分析平台,利血平为内标物,构建定量检测LPC14∶0、LPC 15∶0、LPC 16∶0、LPC 17∶0和LPC 18∶0系列物质的检测方法。绘制每种目标LPC对应的标准曲线,分析其相关系数r值,并进一步评估检测平台的灵敏度检测下限(LOD)和线性范围。通过加样回收试验验证检测平台的准确度(加样回收率)和精密度(RSD),并进一步分析该平台在检测人血清标本的适用性。在此基础上,利用该HPLC-MS/MS平台分析了LPC 14∶0~LPC 18∶0 5个LPCs在乙肝相关性肝细胞肝癌(HBV-HCC)患者血清中的浓度。结果:本研究建立了基于HPLC-MS/MS的LPC检测平台,该平台检测稳定性和准确性较高。LPC 14∶0~LPC 18∶0 5个物质的检测下限分别是0.027、0.120、0.320、0.059、0.072μg·mL-1;标准曲线方程分别为Y=0.725X-0.002 64、Y=0.212X-0.025 6、Y=1.22X+1.84、Y=0.861X-0.015 5和Y=0.813X+0.558,相关系数分别为0.997 6、0.999 2、0.992 7、0.998 0和0.994 3,测量结果准确度和精密度均控制在85%~115%范围内。利用HPLC-MS/MS平台测定的5个LPC类物质,对不同巴塞罗那期HBV-HCC患者具备一定的鉴别能力。结论:本研究利用HPLC-MS/MS分析平台,成功建立了一个稳定、灵敏而可靠的定量检测人血清中LPC 14∶0~LPC 18∶0 5个目标LPC类物质的检测方法,适合临床推广。
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