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清热明目茶HPLC特征指纹图谱研究及多成分含量测定

作者:周捷 阮健 袁静

关键词: 清热明目茶; 绿原酸; 橙黄决明素; 大黄素; 大黄酚; 大黄素甲醚; 大黄酸; 芦荟大黄素; 指纹图谱; 相似度分析; 聚类分析;

摘要:目的:建立清热明目茶HPLC指纹图谱并测定清热明目茶中绿原酸、橙黄决明素、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚、大黄酸、芦荟大黄素的含量,为清热明目茶的质量控制提供参考。方法:采用Hypersil Gold C18(250mm×4.6 mm,5μm)色谱柱;以乙腈(A)-0.5%磷酸水溶液(B)为流动相,梯度洗脱(0~12 min,15%A;12~20min,15%A→28%A;20~36 min,28%A→40%A;36~50 min,40%A→50%A;50~60 min,50%A→55%A;60~68 min,55%A→62%A;68~74 min,62%A→85%A;74~90 min,85%A→15%A),流速:1.0 mL·min-1;检测波长为327 nm(0~20 min,检测绿原酸)和287 nm(20~80 min,检测橙黄决明素、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚、大黄酸、芦荟大黄素);柱温28℃,进样量10μL。通过相似度评价结合聚类分析对12批次清热明目茶指纹图谱进行质量评价,并对指认的7个指标成分进行定量测定研究。结果:建立了清热明目茶的指纹图谱,标定了21个共有峰,12批清热明目茶与对照图谱的相似度均≥0.94,聚类分析将其分为3类。绿原酸、橙黄决明素、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚、大黄酸、芦荟大黄素的线性范围分别为0.041 6~0.416 4μg、0.386 2~3.862 2μg、0.180 6~1.805 9μg、0.209 8~2.097 7μg、0.040 1~0.400 8μg、0.100 1~1.001 3μg、0.108 1~1.080 5μg,线性关系良好(r≥0.999 4);重复性试验RSD<1.5%,平均加样回收率在98.9%~104.2%。12批样品中上述7个成分的含量范围分别为0.410 3~0.451 3、2.314 1~2.365 6、1.186 3~1.216 9、1.890 1~1.959 1、0.410 8~0.423 4、0.631 8~0.653 7和0.588 9~0.616 8 mg·g-1。结论:所建立的清热明目茶HPLC指纹图谱检测和定量分析方法准确可靠,专属性强,灵敏度高,能全面反映其内在质量,可用于清热明目茶的质量控制。


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