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改构溶瘤腺病毒DNA序列分析研究
作者: 刘兰 史新昌 黄永兴 李永红 饶春明
关键词: 改构溶瘤腺病毒制品; 基因治疗制品; DNA序列变异体; 第一代测序; 第二代测序;
摘要:目的:以改构的溶瘤腺病毒制品为研究对象,探讨DNA测序技术在基因治疗制品质量控制和质量标准制定中的作用。方法:提取并纯化一种改构溶瘤腺病毒制品的基因组DNA,对其基因组关键区段、非关键区段进行测序分析,发现变异体后应用第一代和第二代DNA测序技术进行进一步分析和检测。结果:关键区段DNA序列与理论序列一致;非关键区段DNA序列与理论序列相似度大于99.9%;发现1个高变异区段,进一步分析结果显示:缺失1个胞嘧啶(C)的变异体占比5/9(克隆/克隆);缺失2个胞嘧啶(C)的变异体占比1/9(克隆/克隆);插入1个胞嘧啶(C)的变异体占比1/9(克隆/克隆)。结论:第一代和第二代DNA测序技术虽然各有优缺点,但只要相互组合使用得当,仍然可较好地用于基因治疗制品基因组的分析和质量控制。
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